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Cultrex BME基质胶操作指南,提供薄层法、厚层法、夹心法和包埋法的实验方案,可以适用于原代细胞增殖、iPSC扩增、细胞侵袭、管腔形成、类器官培养等实验。
查阅维基百科(Wikipedia),可以发现全球范围内最知名的两类BME产品分别为:BD公司(现被Corning收购)的Matrigel® 和 Trevigen公司(现被R&D Systems收购)的Cultrex® BME产品。
自从R&D Systems宣布正式收购Trevigen品牌,基质胶相关产品持续火爆······
什么是基质胶?
基底膜提取物(BME),又称为基底膜基质或基底膜基质胶,是一种商业上销售的、包含有ECM蛋白的基质胶,其中包含胶原蛋白、层粘连蛋白、巢蛋白和硫酸肝素蛋白聚糖。BME中的ECM蛋白混合物在引导细胞行为和健康方面发挥着重要的作用,不仅提 供了关键的生长底物,还可为细胞间相互作用提供优化的环境,促进类似体内的2D和3D生长动态。
细胞培养中细胞外基质的关键特征
BME用途广泛,在不同培养条件下,可用于原代内皮细胞、上皮细胞、平滑肌细胞和干细胞的维持性生长和促进分化。BME也可用于细胞粘附、轴突生长、 血管再生、体外细胞侵袭和体内肿瘤发生等。
云南驰恩科技提供R&D Systems 的一系列Cultrex®基底膜提取物(BME),非常适合从多能干细胞和肿瘤干细胞中产生类器官与进行3D培养。R&D Systems拥有业界最好品质的活性蛋白生长因子,现在更为您带来3D培养最佳基质胶Cultrex BME产品线,是您细胞培养的品质之选。
BME的几个关键要素
1.基质胶货号中(P)是指含有酚红指示剂,一般推荐不带酚红,酚红可能会干扰后续的荧光检测实验;
2.品名中出现“Reduced Growth Factor”,即低生长因子,一般用于干细胞和信号通路研究(排除生长因子干扰);
3.Type2的胶强度大于普通级别,Type3胶强度大于Type2,Type3适合体内实验。
4.普通肿瘤侵袭、迁移,血管新生等实验可选择普通级别:3432;
5.3D细胞培养专用:3445;
6.类器官培养专用:3533;
7.裸鼠体内成瘤:3632;
8.多能诱导干细胞或胚胎干细胞应用:3434。
9.做侵袭/迁移实验,我们也提供已铺好基质胶的板子,品名中有CultreCoat®标记的产品,基质胶涂层密度可以选中、高、低。
基质胶如何冻融?
融化:在使用前一天,将基质胶小瓶浸入置于4度冰箱的冰中过夜解冻;解冻后,旋转小瓶以确保混匀。
注意!融化后的基质胶在15℃以上,会迅速凝固,操作的时候放置在冰上,防止过早凝固;与基质胶接触的所有培养器皿、耗材和培养液均应预冷,整个实验过程需始终保持基质胶置于冰上。对融化后的基质胶进行分装,需用预冷的冻存管,迅速冷冻并保存,避免多次冻融。
成胶:根据具体实验设置,基质胶可用无血清培养基稀释(为了保证成胶性能和稳定性,稀释比例不应低于1:3),也可将培养的细胞与基质胶混合,37℃放置30min,即可成胶。
Cultrex BME注意事项
● 基质胶产品均是干冰运输,-20℃下可保存3个月;-80℃可长期保存。
● 将冷冻的Cultrex BME置于2-8℃的冰箱内,在冰上过夜解冻。这样可以充分融化,同时让产品保 持在稳定的低温环境
● 按每次使用量分装Cultrex BME将分装产品放置在-80℃长期保存
● 切勿在2-8°C保存Cultrex BME超过一天
● 如果温度超过18℃ Cultrex BME将会变成凝胶,因此必须始终置于冰上,并使用预冷的耗材和 工具(如移液吸头),且动作要快。
● 始终使用预冷的细胞培养基稀释Cultrex BME
Cultrex BME 基质胶产品列表
名称 |
规格 |
货号 |
Cultrex Basement Membrane Extract |
1ml |
3432-001-01 |
5ml |
3432-005-01 |
|
2X5ml |
3432-010-01 |
|
Cultrex Reduced Growth Factor Basement Membrane Extract |
1ml |
3432-001-01 |
5ml |
3432-005-01 |
|
2X5ml |
3433-010-01 |
|
Cultrex 3-D Cultre Matrix™ Basement Membrane Extract, Reduced Growth Factor |
1ml |
3445-001-01 |
5ml |
3445-005-01 |
|
2X5m |
3445-010-01 |
|
Cultrex Mouse Laminin I, Pathclear |
1mg |
3400-010-02 |
Cultrex Mouse Collagen IV |
1mg |
3410-010-02 |
Cultrex Human Fibronectin, PathClear |
1mg |
3420-001-01 |
Cultrex Human Vitronectin, PathClear |
50 µg |
3421-001-01 |
Cultrex Rat Collagen I |
5 mg |
3440-005-01 |
Cultrex Rat Collagen I |
100 mg |
3440-100-01 |
Cultrex Bovine Collagen I |
1 mL |
3442-005-01 |
Cultrex Bovine Collagen I |
50 mg |
3442-050-01 |
Cultrex 3-D Culture Matrix Laminin I |
30 mg |
3446-005-01 |
Cultrex 3-D Culture Matrix Rat Collagen I |
100 mg |
3447-020-01 |
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